系统获得抗病性基因转化烟草的研究

系统获得抗病性基因转化烟草的研究导师：邓晓玲副教授学生：谢盛红郭明概述本研究是将系统获得抗病性的调控基因NPR1通过农杆菌介导，利用叶盘转化法使农杆菌介导的NPR1基因与烟草叶盘共培养，通过诱导生芽、生根，获得再生细菌植株，经PCR检测24株再生植株，检测结果表明有4株含有目的基因NPR1，说明已经将系统获得抗病性基因NPR1成功转入烟草中。目的和基本思路本研究是将系统获得抗病性的调控基因NPR1通过农杆菌介导、转入烟草植株内，经PCR检测植株含有目的基因，然后进行转基因植株的抗病性测定，检测其是否有广普抗病性。科学性、先进性及独特之处本研究所使用的来自拟南芥的NPR1基因是一种比较新的基因,利用叶盘法将该基因转化到烟草中,使其具有广普抗病性，避免了由于化学防治所带来的3R问题。方法与步骤1烟草转化外植体的获得及消毒播种——网室培养——取嫩叶——消毒2烟草叶盘及农杆菌对抗菌素羧苄青霉素（Carb）、卡那霉素（Kan）的敏感性试验3农杆菌工程菌液的制备4叶盘共培养法转化烟草4.1共培养烟草无菌苗剪成叶盘——农杆菌培养液中共培养——MS1培养基上培养4.2诱导丛生芽共培养60h——洗掉叶盘表面农杆菌——MS2培养基培养——两周后切下带芽的叶缘插入MS2培养基上继续培养4.3诱导生根